HPLC 色谱柱是液相色谱的重要组件，因为它是负责分离基质中分析物的色谱柱。保护和保养色谱柱可确保我们不仅获得可靠的结果，还能无故障操作。我们都知道 HPLC 色谱柱的使用寿命是有限的，但是如何确保获得最长的使用寿命呢？

要回答这个问题，让我们首先看看色谱柱可能被阻塞的原因。

        一、引入 HPLC 色谱柱的样品通常多种多样且复杂

        样品含有许多可能与 HPLC 方法条件不兼容的成分。在没有适当的样品制备/预处理的情况下注入此类样品可能会导致色谱柱堵塞。在反相分离过程中，残留的蛋白质和高疏水性化合物（如脂质）也可能不会完全洗脱出来，它们往往会慢慢吸附到色谱柱上并引起问题。

        二、不兼容的样品稀释剂和流动相

        如果样品稀释剂与流动相不相容，那么当将样品引入流动相时，样品可能会沉淀。如果稀释剂与流动相相比极性太强或非极性，这通常会出现。

         流动相缓冲液：缓冲液通常用作 HPLC 中的流动相。重要的是在使用前过滤这些缓冲盐。有时，由于实验室温度的不同，一些缓冲液成分容易沉淀。使用过高浓度的缓冲液也会导致沉淀。

        三、来自磨损的泵密封件的颗粒物

        泵密封件和喷油器转子密封件通常由橡胶材料制成。由于正常磨损，这些组件往往会在溶剂管路中产生一些碎屑。如果不对泵和进样口进行定期维护，碎屑往往会到达色谱柱筛板并堵塞色谱柱。

        四、现在我们知道了可能导致阻塞的原因。我们如何保护它？

       为了保护 HPLC 色谱柱（分析型和制备型）免受污染，例如进样中的微粒、未过滤的流动相组分或进样器磨损的泵密封/转子密封的碎片，建议使用恒谱生液相色谱保护柱。

         五、什么是保护柱？

        保护柱本质上是一个微型柱，理想情况下填充与分析柱相同的填料，并连接在分析柱之前。保护柱中的筛板与分析柱中的筛板类似。这意味着任何可能阻塞分析柱的东西都会被保护柱阻塞。然后可以通过简单地更换色谱保护柱来移除污染物，从而保护分析柱的使用寿命。

        为了了解保护柱对色谱柱寿命的作用，我们采取了实验。对于未受保护的色谱柱连续进样基质会导致反压稳定且不可逆地增加。如果没有恒谱生液相色谱保护柱保护，反压会呈指数级增长。这种背压的增加最终会导致色谱退化，包括谱带展宽和可能的峰分裂。因此，方法灵敏度、定量和峰识别也可能受到不利影响。

        使用恒谱生HPLC液相色谱耗材直连（联）分析保护柱，大大延长了色谱柱的使用寿命。在这种情况下，基质的连续进样仍会导致压力升高，但这是由于颗粒物被捕获在 保护柱本身中，而不是在 UHPLC/HPLC 色谱柱中。因此，只需定期更换直联保护柱，反压即可恢复到起始水平，有效色谱柱寿命大大延长。

        六、购买保护柱时我应该寻找哪些功能？

        保护柱的填充材料（固定相）应与分析柱的填充材料相同，这样选择性不会发生变化。保护柱的 ID 应与分析柱的 ID 相同或小于分析柱的 ID，以尽量减少增加的谱带展宽。始终使用 ID 最接近色谱柱 ID 的防护装置。保护柱的长度应尽可能短以避免额外的死体积。