HILIC-ZIL两性离子柱-高效解决极性化合物分离产品
如何高效分离极性化合物,是众多化学分离领域从业者非常在意的问题。近年来,由于技术的更新,亲水作用色谱(HILIC)在极性化合物分离使用场景越来越多,尤其在核苷类,糖类化合物,有机酸,氨基酸,多肽分析等应用中,能看到各类HILIC柱品牌的使用。
相对于传统的反相色谱分离,HILIC具有强极性化合物的洗脱效果,最终分离效果会好很多,这也进一步提高了企业的生产效率,节约生产成本。而在众多的商业化HILIC柱中,两性离子型HILIC柱是市场上使用比较多的一款。本文主要给大家介绍HILIC-ZIL两性离子柱工作原理及分离效果。
工作原理
从结构上看,HILIC柱的固定相是极性官能团,与正相色谱有点类似,但是HILIC条件流动相中有一定比例的水,而传统正相色谱体系确实不存在水的。在分离过程中,正相体系下极性化合物容易被吸附在硅胶表面,这类化合物很难被洗脱干净。而HILIC体系有一个亲水层,因此不会出现强吸附问题。
HILIC柱工作时,其固定相表面的亲水作用会建立一个富集水的液体层,分析物就会在流动相和该亲水层间进行分配。主要表现为中性的极性化合物与固定相表面的极性基团通过氢键作用;易带电的极性化合物亲水层进行离子交换作用;弱极性或非极性化合物通过水与有机相的分配作用。
固定相和水就形成一层“亲水层”。而HILIC对极性化合物的分离机制就取决于固定相结构以及“亲水层”的厚度。
分离效果
HILIC色谱柱的流动相使用的是高浓度极性有机溶剂和水的混合液。有机溶剂常可以选择乙睛或醇类化合物,水的含量通常为5%以上。
一般来说,0.5-1%含量的水,,就可以形成很厚的“亲水层”,从而多层吸附。分析物在“亲水层”和流动相之间进行分配。HILIC体系下水相是洗脱相,水相比例的提高有助于强极性化合物进行洗脱,具体洗脱情况如下图所示。
规格参数
命名 |
粒径 |
比表面 |
碳载量 |
pH耐 |
特点及应用 |
常用产 |
USHD |
5μm,100Å |
400 |
6 |
2-9 |
> Hilic亲水作用离子交换色谱柱,键合两性离子官能团,可分离包含酸性、碱性和/或两性离子的溶质。 |
4.6*250 |
以恒谱生uHPLCs公司的HILIC-ZIL两性离子柱为例,它是以磺酸烷基甜菜碱为功能基的两性离子柱。
磺酸烷基甜菜碱具有离子对色谱中反离子的作用,磺酸根带负电荷对带正电的分析物有静电作用,甜菜碱带正电荷对带负电的分析物有静电作用,磺酸根在外侧,因此对带正电的化合物静电作用更强。对于嘌呤和嘧啶等元素有着非常突出的分离效果(具体分离情况如下图所示)。
(1)胸腺嘧啶(2)尿嘧啶(3)腺嘌呤(4)鸟嘌呤(5)胞核嘧啶
在实际使用中,由于中溶质、固定相和流动相相互作用及其复杂性,很多分离效果并没有达到理想状态,HILIC在极性化合物分离中的显著效果,可弥补反相色谱的局限性。
更多分离技术的提高,依赖于技术手段的提高和研发人员的辛勤投入。恒谱生作为专业的仪器耗材供应商,致力于不断提高色谱柱分离效果与产品质量。
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发布于: 2024-06-27