HPLC和GC是已在化学实验室中站稳脚跟的分离技术。这两种技术的基本目的是分离和量化有机混合物的成分。
您有没有想过为什么HPLC色谱柱比 GC 色谱柱更短更宽。在回答这个问题之前,您应该了解柱长度的好处。
一、柱长:
随着液相色谱柱长度的增加,洗脱化合物和固定相之间的相互作用时间也会增加,从而提高色谱柱效率和分离度。这导致分离良好的峰。然而,由于柱头压力增加和分析时间增加而面临的实际问题,不能无限增加柱长。
HPLC 色谱柱的尺寸要求取决于分离目标。通常的分析应用要求色谱柱长度为 15 – 25 cm,内径为 4.6 mm,恒谱生的液相分析柱有2.1、3.0、4.0、4.6、7.8内径可选,长度20-250mm不等。
如果追求高效率分析,USHA这一系列色谱柱非常适合您。它提高了速度和分辨率。可提供70- 300 Å孔径,1.8、2、3、5、10粒径的色谱填料。同时有许多不同的固定相可供选择(C18、C8、苯基、C4、C3、C1、氰基 [CN]、PFP、F-C8 和 C30),建议使用这些色谱柱进行小分子反相分离,是非常耐用的液相分析柱。
制备色谱柱可以更宽,直径范围为 20 – 50 mm。恒谱生制备柱从10-50内径不等,长度20-250mm不等,几乎涵盖了常用的多种尺寸。即使需要更长的柱管,恒谱生也能提供定制。
二、气相色谱柱:
气相色谱柱基本上分为填充柱和毛细管柱。填充柱通常长约 1.5 m 或 6ft,外径为 1/8” 或 3.2mm。另一方面,毛细管柱长几米(10-100m)。填充柱由玻璃或不锈钢制成,而毛细管柱由熔融石英软管制成。柔性管允许将长柱作为圆形线圈容纳到柱温箱中。现在检查两种技术在分离过程中的差异,以得出关于 GC 和 HPLC 柱之间长度差异的基本问题的合乎逻辑的答案。
三、流动相:
流动相的性质——首要的原因是被称为流动相的载液的性质。HPLC 使用液体作为样品通过色谱柱的载体,而在 GC 中,气流用于携带样品。液体比气体具有更高的粘度,因此在通过色谱柱时会遇到更大的阻力。色谱柱越长,流动相的流动阻力越大,因此 HPLC 需要更短的色谱柱长度。恒谱生小型化液相色谱柱空柱管总成10X20mm就是专门为需要比较短柱长的客户研发。死体积很小,管内壁光滑,横截面均匀呈圆形;保证色谱柱制成品的高性能。
四、样品:
样品挥发性——注入 HPLC 的样品是液体,而在 GC 中它可以是液体或气体。但是,在进入 GC 色谱柱之前:由于进样器模块中的高温,液体会转化为蒸气。气体在 GC 色谱柱中遇到的阻力较小,这允许使用更长的色谱柱长度。
五、稳定性:
样品稳定性——通过 HPLC 分析的样品通常是热不稳定的,因此它们在 HPLC 柱中在室温下处于液相。另一方面,进入气相色谱柱的样品是具有较低分子量和沸点的气体。此类化合物在通过色谱柱期间很容易蒸发并以气体形式保留。
进一步缩短色谱柱长度,特别是在新的 UHPLC 应用中,导致分析速度加快,灵敏度提高。分析应用的未来趋势必然是将 HPLC 色谱柱长度和分析时间从几分钟缩短到几秒钟。
发布于: 2022-08-05