高效液相色谱柱如何选择

        高效液相色谱柱基于单分散硅胶微球,采用先进的表面键合和修饰技术,经优化的装填工艺而成。独特的封端工艺使硅羟基活性降到最低,适用于分离具有不同疏水性的化合物。下面小编说说高效液相色谱柱选择原则。

        高效液相色谱柱选择之一看物理性质。例如看柱长,内径,粒径,孔径,颗粒形状等参数有没有符合自己要求。

        高效液相色谱柱选择之二看化学性质。硅胶基质:最通用的基质,强度大,化学修饰容易,但使用的pH值范围有限(一般为2—8,特殊修饰的可以达到1—12)。聚合物基质:多为聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂,化学稳定,应用pH范围宽,具有更强的疏水性,对蛋白质等样品分离效果较好;但强度较小,有机溶剂可能导致聚合物溶胀而受损,批次重复性较差,商品化色谱柱不多,一般价格较贵。载碳量:基质表面键合相的比例,载碳量高,则保留增加,适合分析非极性化合物。键合相:键合试剂不同,对化合物的选择性不同,一般长链的烷基键合相(C18 、C8)比短链的(C4、 C3)稳定;非极性的键合相比极性的键合相(-NH2)稳定。封端:用短链将裸露的硅羟基键合后封闭起来,以减少残留的硅醇基,减轻待测组分与酸性硅羟基反应而引起的色谱峰拖尾现象。尤其对于极性样品而言,未封端处理的色谱柱分离效果较差。

高效液相色谱柱选择

        高效液相色谱柱选择之三根据柱长及内径选择。长度的选择:柱越长,总柱效越高(n值越大),柱越长,分析时间也越长。实验室一半以上的工作采用250—300mm,这也是普遍柱长。

        最后总结高效液相色谱柱选择:目前市场上主要以反相色谱为主,约占80%的比例。分析大分子量化合物选择大孔径色谱柱;对于高pH值或者碱性化合物需要选择高封端或者特殊封端的色谱柱,以改善峰形,延长色谱柱使用寿命等。更多有关液相色谱柱请看https://www.hplcs.cn/

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发布于: 2023-01-30