液相色谱对于实验室分析员来说是容易上手的仪器了,但就算是经验丰富的分析员都会经常出现错误的操作导致液相色谱仪器发生故障。而这个时候分析员一般就会选择把色谱柱进行反冲这个方法,但恒谱生在这里建议分析员在一般情况下还是不要反冲色谱柱,除非色谱柱有特别说明是可以反冲的。
那么,哪些柱子不能反向冲洗呢?其实有两种,一种是两端柱筛板不一样是不适合的,因为入口的那一端柱筛板的孔径比较大会导致固体颗粒物质的堵塞,所以一旦进行反冲就有可能出现造成填料的流失从而导致分析柱的柱效下降的情况;另一种就是色谱分析柱柱头塌陷或变型是不宜反冲的,因为柱头塌陷或变型了会在柱头上留下缝隙,从而在反冲的时候会导致柱床移动和填料松动。
虽然液相色谱柱不应该随便进行反冲,但如果明确知道来自颗粒物堵塞筛板或柱头污染时,反冲色谱柱是最有效补救措施。但反冲前确认柱子是否能够进行反冲,反冲的时候要注意以下几点:
1、在把堵塞在入口那一段端的筛板上的污染物冲出来的同时,柱头的填料可能也会被冲出来造成柱效的降低,甚至色谱柱的报废。
2、如果色谱柱出入口筛板孔径不一致的话,反冲色谱柱就有可能造成填料漏出,柱效降低等
3、根据自己用的柱子情况分析到底是什么原因堵塞,可以用易溶于污染物的溶剂来清洗。目前较多的是缓冲盐盐析造成,可以用大量的水来冲洗。
4、反冲后要把柱子正过来使用,尽量避免长期反复正反使用。
除了反冲,想要延长色谱柱的使用寿命,可以在分析柱前连接液相保护柱。保护柱安装在HPLC系统的进样阀和色谱柱之间,目的用于保护色谱柱和延长色谱柱使用寿命。恒谱生液相制备保护柱为色谱柱提供方便、经济和有效的保护,延长了液相色谱柱的寿命,保证分析结果的重现性。随着使用时间的增加,高效液相色谱柱分离效能下降,柱压增高,其原因主要是由于色谱柱进口段的少量填料被污染引起的,而色谱柱整个柱床并未被破坏,使用色谱柱保护柱,相当于在色谱柱前增加了一段额外的填料,起到了保护整个UPLC色谱柱的作用。
今天恒谱生分享的知识先到这啦,希望对您的工作有所帮助!
发布于: 2022-11-25