一、HPLC色谱柱的安装:
首先检查色谱柱与仪器的连接和管道是否匹配。使用色谱柱测试程序中建议的过滤和脱气流动相冲洗您的 HPLC 泵和管路。确保系统中没有气泡。将流速设置为0.1mL/min 并连接到色谱柱入口,确保流速沿色谱柱上箭头指示的方向。拧紧进入色谱柱的末端接头,将流速增加到 1mL/min(仅适用于4.6mm ID 色谱柱)持续5分钟。在连接到流通池之前,停止流动并擦拭色谱柱的出口端以去除其他任何的颗粒。将色谱柱出口连接到流通池,以1 mL/min 的速度将大约10个色谱柱体积通过系统(仅适用于 4.6 mm ID 色谱柱),同时观察背压。稳定的背压表明流量恒定,而出现波动可能表明系统中有空气,大幅波动可能会冲击和损坏色谱柱。当压力稳定在规定的范围内时,色谱柱就可以使用了。
同时在更换溶剂时重新平衡系统时,切勿将一种溶剂换成另一种不混溶的溶剂,无需通过与两者混溶的中间溶剂,否则会损坏色谱分析柱的性能。如果缓冲液/盐不溶于第二种溶剂,切勿换成(或换出)缓冲液/盐溶液。这也是会损坏色谱柱的性能的。对于更复杂的样品和延长液相色谱柱的使用寿命,建议在色谱柱前安装保护柱。
二、多久检查一次色谱柱的性能或质量:
对于需要多久检查一次色谱柱的性能,没有一般的经验法则,这取决于使用情况和应用。建议在新色谱柱上运行测试样品并将其作为参考。随着时间的推移,将您自己的测试色谱图与此原始色谱图进行比较可以帮助您评估色谱柱是否失去了柱效,或者是否有其他影响性能的变化。可以通过定量分析效率、选择性、分离度和压力等参数了解色谱柱的比较性能。
三、色谱柱日常使用维护保养:
1.选择合适的液相保护柱,免受非挥发性材料的损坏和污染,保护柱填料的粒径应尽可能与色谱柱填料的粒径相同。
2.留意色谱柱的pH范围。
3.避免猛烈撞击或掉落色谱柱,因为物理冲击会在色谱柱中产生空隙和通道,从而导致峰拖尾和柱效损失。
4.确保色谱柱末端接头、管螺母和套圈兼容。连接不兼容的接头会导致泄漏、增加死体积和损坏色谱柱螺纹。
5.如果色谱柱上刻有箭头,请安装色谱柱,使流向与箭头一致。大多数色谱柱都有一个优选的流动方向,旨在避免色谱柱出现问题和故障。
今天恒谱生分享的知识先到这啦,希望对您的工作有所帮助!
发布于: 2022-11-04