高效液相色谱法是提取和纯化甜味剂木糖醇的可靠技术。木糖醇在食品工业中被广泛用作替代甜味剂;它的甜味与蔗糖相似,热量只有三分之二。这种五碳糖存在于许多植物中,但大多浓度较低(约 1%),因此提取和纯化成本很高。因此,迄今为止,木糖醇主要通过化学方法生产,使用催化木糖脱氢。
一、在木糖转化中引入 HPLC
一种有吸引力的替代方法是通过发酵将生物质(例如麦秸)中的木糖转化为木糖醇。通过该工艺,甜味剂可以在温和条件(大气压和环境温度)下以高产率生产,不含有害化学物质。
一旦微生物合成了所需的木糖醇,就可以 通过高效液相色谱(HPLC)对其进行提取和纯化。HPLC 是一种快速、准确且重现性高的技术,可用于定性和定量分析。此外,一旦针对特定物质优化了 HPLC 方法,该过程就会在很大程度上实现自动化,从而减少时间和成本。
为了优化 HPLC 过程,应仔细考虑 HPLC 系统的不同组件(泵、阀、色谱柱和检测器)。HPLC 泵负责驱动样品溶液以一定流速 (mL/min) 通过色谱仪,从而实现样品中不同成分的最佳分离。
阀门在 HPLC 应用中无处不在,多位阀门的使用是木糖醇提取和纯化过程的理想选择,因为它只允许收集含有这种糖的特定部分。
二、HPLC色谱柱
HPLC 色谱柱(固定相)是样品溶液(流动相)中组分分离的场所。这些组分将与固定相发生不同程度的相互作用,导致它们在不同的时间洗脱,并允许对目标物质进行特定的提取和纯化。恒谱生有多种 HPLC 色谱柱可供选择,它们具有不同的物理和化学参数,可以有效分离大量物质。
近年来,恒谱生发布的一系列 HILIC 固定相外,专门为 HILIC 推出的色谱柱包括USHA Diol、USHA sil和USHB sil系列。可用于用于各种极性、碱性化合物,包括极性农药(草甘膦)、未衍生化氨基酸和超短链 PFAS 分析。
多种检测方法可用于 HPLC:紫外、电化学、蒸发光散射 (ELS) 和反射指数 (RI)。由于木糖醇不含任何发色团,因此最适合此目的的 HPLC 检测器是ELS (仅用于分析) 或 RI。
最近,有科学家们使用 HPLC 纯化系统在批处理过程中优化了木糖醇的纯化,该团队从发酵醪中实现了 >99% 的木糖醇回收率,纯度 >99%。与以前的方案相比,还实现了洗脱时间的减少和进样量的增加,证明了通过 HPLC 可以实现木糖醇的高效和准确纯化。
发布于: 2022-06-24