液相色谱柱是由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管的材质有很多,比如聚合物、玻璃、不锈钢等。但是建议柱管用不锈钢材质,因为不锈钢这种金属耐高压、耐腐蚀且硬度高,相比于玻璃等材质不易摔坏。不过当压力不高于70Kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管。对于液相色谱柱柱管内壁要求有很高的光洁度,不锈钢柱内壁会经过多次抛光,这是为提高柱效,减小管壁效应。恒谱生0.1μm高光洁度色谱柱柱管能够快速分析的同时保持超高的柱效;使用寿命长,不仅能够减少频繁更换色谱柱带来的重新进行方法验证、条件摸索等工作,还大大的降低了使用成本;具备优良的选择性和分离能力。
除了抛光,也有在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料来提高内壁的光洁度,其效果与抛光是相同的。色谱柱两端的柱头内装有筛板,通常是不锈钢和peek材质制作的,根据需求选择与色谱柱匹配的柱筛板,孔径取决于填料粒度,目的是防止填料漏出。
柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定,目的是为了避免管壁效应。
液相色谱柱的柱长及内径的选择原则是什么?长度的选择:柱越长,总柱效越高(n值越大),柱越长,分析时间也越长。250—300mm是普遍的柱长,实验室一半以上的工作都是采用此规格柱子,一般用来分离l0到50个组份的中等至复杂混合物;500—600mm,要求较高分辨率的应用,—般用来分离大于50个组份或包含有难分离物质的复杂样品程序升温分析。
内径:柱效率与柱半径平方成反比,内径越小柱效越高,但内径越大,柱容量也增加,允许进样量就越多。当进样量超过柱容量时,则因柱内每块理论板内不能建立真正的平衡,将会导致色谱峰畸变,柱分辨率降低,重现性不好。因此对于复杂样品需要准确分离,必须使用小内径柱子。另一方面若样品中存在具有很不相同浓度组份化合物,为了增加样品容量就必须使用内径大的柱子,目前实验室使用常见的柱子内径一般是4.6mm。
分析大分子量化合物选择大孔径色谱柱;对于高pH值或者碱性化合物需要选择高封端或者特殊封端的色谱柱,以改善峰形,延长色谱柱使用寿命等。恒谱生液相色谱柱内径有2.1、3.0、4.6、10mm可供选择,不锈钢材质不易因为磕碰损坏柱管。
以上就是一些关于液相色谱柱柱长及内径的选择原则,供大家参考。 深圳市恒谱生科学仪器有限公司是致力于研发制造高质量色谱耗材的高科技生产厂家,我们在UHPLC超高压在线过滤器、色谱保护柱、液相色谱柱、色谱填料、鬼峰捕集柱、无气泡高净化能力的溶剂滤头、0.1μ高光内表粗糙度柱管等领域具有多年的生产经验和较强大的制造能力。
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发布于: 2021-01-22