凝胶过滤色谱(Gel filtration chromatography,GFC)是一种液相色谱技术,基于固定相的孔径大小和分子大小对样品进行分离。
在凝胶过滤色谱中,固定相是一种多孔凝胶,它可以通过分子大小的差异来分离不同的化合物。凝胶过滤色谱的原理是,当含有混合物的流动相流经固定相时,样品分子会被固定相吸附或排斥,从而在固定相中滞留或快速通过。样品分子的大小和形状决定了它们在固定相中的滞留时间,从而实现分离。
凝胶过滤色谱适用于分离分子大小差异较大的样品,如蛋白质、多肽、DNA 等生物大分子。它具有操作简便、分离效率高、样品回收率高、重现性好等优点,是一种常用的液相色谱技术。
在凝胶过滤色谱中,常用的固定相有葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等。流动相通常是水或缓冲液。样品可以通过注射器或进样阀注入色谱柱中,然后用紫外吸收检测器或示差折光检测器等检测器进行检测。
凝胶过滤色谱的分离效果与凝胶的孔径大小、交联度、流动相的流速、pH 值等因素有关。通过优化这些条件,可以实现不同样品的分离和纯化。
发布于: 2023-09-18